Mol. Beacon Probe 5’ HEX + 3’ BHQ-1_ 40 nmol scale

Los Molecular Beacons son sondas que contienen una estructura de tallo-bucle, un fluoróforo y un supresor en sus extremos 5’ y 3’, respectivamente.

Eurogentec es un proveedor histórico de Molecular Beacons y ofrece una gran cantidad de fluoróforo y supresores. Todos los Molecular Beacons se proporcionan purificados por HPLC doble y controlados por HPLC analítica y espectrometría de masas MALDI-TOF. La longitud máxima de los Molecular Beacons estándar es de 45 bases. Los Molecular Beacons se proporcionan liofilizados en tubos individuales.

Eurogentec determina, a petición, la relación señal-ruido (STNR) para cada Molecular Beacon al hibridarlo con su secuencia complementaria y comparar la fluorescencia con el fondo. Para los Molecular Beacons etiquetados con FAM, la STNR debe ser > 15. Todos los demás tintes requieren una relación señal-ruido > 10.

¿Cómo funcionan los Molecular Beacons?

La secuencia de 'tallo' mantiene el fluoróforo y el supresor juntos, pero solo en ausencia de una secuencia complementaria a la secuencia del 'bucle'. Mientras el fluoróforo y el supresor estén cercanos, los fotones emitidos por el fluoróforo son absorbidos por el supresor. Este fenómeno se llama supresión colisional (o proximal).

En presencia de una secuencia complementaria, la sonda se desdobla e hibrida con el objetivo, el fluoróforo se desplaza del supresor, el cual ya no puede absorber los fotones emitidos por el fluoróforo, y la sonda comienza a fluorescer. La cantidad de señal es proporcional a la cantidad de la secuencia objetivo y se mide en tiempo real para permitir la cuantificación de la cantidad de secuencia objetivo.

Tintes:

• HEX - Absorbancia = 535 nm, Emisión = 556 nm

Supresores (Quenchers):

• BHQ-0™: Rango de supresión [430-520] nm; Máximo: 495 nm
• BHQ-1™: Rango de supresión [480-580] nm; Máximo: 534 nm
• BHQ-2™: Rango de supresión [550-650] nm; Máximo: 579 nm
• BHQ-3™: Rango de supresión [620-730] nm; Máximo: 680 nm