Kit de extracción de ADN plasmídico libre de endotoxinas NucleoBond PC 10000 EF Giga prep, 1 kit de 5 columnas

El kit de extracción NucleoBond PC 10000 EF es un kit especialmente diseñado para la extracción de DNA plasmídico con un contenido extremadamente bajo de endotoxinas de una elevada cantidad de muestra de partida (hasta 2000 ml) gracias a su formato de columnas Giga utilizando una tecnología de intercambio aniónico.

Los kits NucleoBond® EF emplean un procedimiento de lisis alcalino/SDS modificado para preparar el sedimento de células bacterianas durante la purificación del plásmido. Tanto el DNA cromosómico como el plasmídico se desnaturalizan en estas condiciones alcalinas. Luego se agrega acetato de potasio al lisado desnaturalizado, lo que provoca la formación de un precipitado que contiene DNA cromosómico y otros compuestos celulares. El tampón de acetato de potasio también neutraliza el lisado. El DNA plasmídico, que permanece en solución, puede volver a su estructura superenrollada nativa. Después de equilibrar la columna NucleoBond® apropiada con tampón adecuado, el DNA plasmídico se une a la resina de intercambio aniónico y finalmente se eluye después de un lavado eficaz de la columna. Las endotoxinas se eliminan mediante Tampón N3-EF. Después de la precipitación del DNA eluído, se puede disolver fácilmente en Tampón TE-EF o H2O-EF para su uso posterior.

• Tecnología: intercmabio aniónico
• Muestra de partida: cultivos bacterianos (E. coli)
• Cantidad de muestra: 500−2000 ml
• Tamaño de lo vectores aislados: hasta 300 Kbp
• Rendimiento típico: 2000−10000 µg
• Capacidad de unión teórica: 10000 µg
• Pureza típica A260/A280: 1.8 - 1.95
• Formato de columnas: Giga
• Manejo de las columnas: por gravedad
• Nivel de endotoxinas: < 0.1 EU/µg DNA
• Precipitación de isopropanol: centrifugación
• Tiempo de preparación: 180 min/ 2 preps
• Aplicaciones posteriores: clonajes, PCR, análisis de restricción, secuenciación…