dUTP_UNG Additive for dttp kit conversion

E. coli Uracil-N-glicosilasa (UNG) hidroliza la liberación de uracilo libre del ADN que contiene uracilo. UNG hidroliza eficientemente el ADN de cadena sencilla o doble, pero no los oligómeros (6 bases o menos).

Al usar la mezcla dUTP/UNG, puedes convertir fácilmente cualquier kit de dTTP MasterMix en un kit compatible con prevención de arrastre en un solo paso de pipeteo.

Procedimiento

Convertir un kit dTTP MasterMix antes de su primer uso:

• Descongelar el MasterMix y el vial que contiene dUTP/UNG a temperatura ambiente (RT)
• Agregar la mezcla dUTP/UNG al vial de MasterMix de la siguiente manera:
• 40 µL en 1.5 mL de MasterMix 2X
• 40 µL en 0.6 mL de MasterMix 5X
• 67 µL por cada tubo de 1 mL de MasterMix 5X
• 200 µL por cada botella de 7.5 mL de MasterMix 2X
• Homogeneizar suavemente el MasterMix agitando el vial
• Seguir las recomendaciones de almacenamiento del MasterMix para el kit convertido

Convertir una reacción qPCR en un ensayo listo para prevención de arrastre (para el kit Core):

• Descongelar todos los reactivos requeridos
• Agregar 0.25 µL de dUTP/UNG por cada reacción de 20 µL (volumen final - consulta la Ficha Técnica del kit Core correspondiente)
• Homogeneizar suavemente la mezcla pipeteando o invirtiendo el tubo varias veces. Centrifugar.
• Iniciar la reacción

Los kits Core siempre contienen la mezcla dUTP/UNG. No es necesario comprar un convertidor de kit adicional.