3' Digoxigenin 200 nmol scale

Al igual que la biotina, la digoxigenina (DIG) se utiliza principalmente como una etiqueta no isotópica para ADN y oligonucleótidos en una amplia gama de aplicaciones: diagnósticos, secuenciación, aplicaciones de blot y hibridación in situ. La etiqueta de digoxigenina se puede detectar mediante ensayos inmunoenzimáticos para conjugados de proteínas anti-digoxigenina y visualizarse a través de una reacción quimioluminiscente.

La digoxigenina puede incorporarse tanto en los dos terminales como dentro de la secuencia. Eurogentec produce estos oligonucleótidos utilizando un modificador amino, ya sea dT, dR o C6, para crear un sitio de unión para la digoxigenina. El brazo espaciador entre el nucleótido y la digoxigenina consiste en una cadena de 12 átomos.

De manera similar al método utilizado para la biotina, hemos demostrado que un oligonucleótido etiquetado con 3 unidades de digoxigenina muestra el mejor compromiso entre la estabilidad de la hibridación de la cadena, el límite de detección y el costo de la sonda. Al igual que con la biotina, las mejores posiciones para estas tres etiquetas son: una etiqueta en cada uno de los terminales y una interna con al menos 15 bases entre las etiquetas, o 3 en cualquiera de los extremos, cada una separada por un espaciador HEG.

La modificación dR-Digoxigenin (deoxirribosa-Digoxigenin) también permite la síntesis de oligonucleótidos que contienen moléculas sucesivas de digoxigenina en cualquier lugar de la secuencia o en cualquiera de los terminales. Cada etiqueta está unida a la deoxirribosa mediante un brazo espaciador de 6 átomos de carbono. Cada dR-Digoxigenin también puede estar separada por un espaciador (generalmente HEG).