La expresión génica es el proceso por medio del cual todos los organismos procariotas y eucariotas transforman la información codificada en los ácidos nucleicos en las proteínas necesarias para su desarrollo y funcionamiento.
En la era post-genómica ha aumentado la demanda para producir más proteínas y en menor tiempo. Por un lado desde el mundo de la investigación se necesitan confirmar las hipótesis sobre la función y estructura de los genes. Por otro, la industria demanda proteínas activas para su uso en Biotecnología y dianas que puedan usarse en la búsqueda de nuevos medicamentos. De esta forma cada vez se producen más moléculas o proteínas en sistemas biológicos para usarse como armas terapéuticas y vacunas.
Los sistemas celulares de expresión de genes heterólogos son generalmente sistemas procariotas o eucariotas, con sus ventajas e inconvenientes.
Para seleccionar un sistema óptimo de expresión hay que tener en cuenta por un lado la productividad, bioactividad, y características fisicoquímicas de la proteína de interés; por otro, el costo, y la bioseguridad del sistema.
Aspectos generales de sobre la producción de proteínas recombinantes
La producción en gran cantidad de las proteínas de interés conlleva los siguientes pasos:
| 1. | Identificación y clonación del gen de interés |
| 2. | Elección del sistema de expresión adecuado |
| 3. | Clonación del gen de interés en un vector compatible con el sistema de expresión elegid |
El punto primero ha sido ampliamente tratado en esta misma página web en la aplicación “clonación”.
Por lo tanto nosotros nos vamos a centrar en los puntos 2 y 3
Elección del sistema de expresión
Los sistemas de expresión se pueden clasificar en dos grandes categorías: procariotas y eucariotas.
Los sistemas de expresión procariotas son generalmente mucho más fáciles para trabajar y son útiles en la mayoría de las aplicaciones, sin embargo tienen importantes limitaciones para expresar proteínas eucariotas completamente funcionales. Esto es debido a que no realizan sobre las proteínas la mayoría de las modificaciones postraduccionales que realizan las células eucariotas y que permiten a las proteínas plegarse de forma correcta para ser plenamente funcionales. Por ejemplo E. coli no realiza la N-glicosilacion ni la O-glicosilación que son modificaciones básicas en las glicoproteínas de organismos eucariotas superiores.
Los sistemas de expresión eucariotas son más complejos y se suelen utilizar cuando no se consigue una expresión óptima mediante los sistemas de expresión procariotas.
El uso del sistema de expresión adecuado requiere evaluar desde el rendimiento, a las modificaciones necesarias para una proteína funcional, a consideraciones económicas si se considera un escalado en la producción de la proteína.